产品简介：

    红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。

    本产品经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞（lymphocyte）或其它有细胞核的细胞。不适用于鸟或禽类等有细胞核红细胞的裂解。本产品主要成分为氯化铵，经过无菌处理。

    经过处理的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合，核酸或蛋白的提取，及各种常规的分析和检测。尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。

使用说明：

    该裂解液为无菌的10×浓缩液，建议与无菌水1：9混合稀释至1×后使用（流式细胞除外）。

组织细胞样品常规操作步骤：.

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2、加入3-5倍细胞体积的稀释到1×的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。室温或4度操作均可。（4℃离心效果更佳）

3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。

4、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。一般极微量的红细胞不影响后续检测。

5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。4℃离心效果更佳。洗涤1-2次。

6、根据实验需要，选用适当溶液重悬细胞沉淀，随后进行计数等后续实验。

组织细胞样品快速操作步骤：

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2、加入5倍细胞体积的1×红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。室温或4度操作均可。

3、加入15-20倍红细胞裂解液体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

4、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

5、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。一般极微量的红细胞不影响后续检测。

6、根据实验需要，选用适当溶液重悬细胞沉淀，随后进行计数等后续实验。

血液样品常规操作步骤：

1、取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。

2、加入6-10倍细胞体积的1×红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-5分钟。室温或4度操作均可。（鼠的血液裂解1-2分钟即可，人的外周血裂解4-5分钟，裂解过程中适当摇动。）

3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。一般极微量的红细胞不影响后续检测。

5、加入5-8倍细胞体积的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。4℃离心效果更佳。洗涤1-2次。

6、根据实验需要，选用适当溶液重悬细胞沉淀，随后进行计数等后续实验。

注意：对于微量或少量的血液样品，可以直接加入10倍血液体积的红细胞裂解液，在室温或4℃裂解4-5分钟。（鼠的血液，裂解4-5分钟；人的外周血裂解10-15分钟，裂解过程中适当摇动。后续步骤相同。）

血液样品快速操作步骤：

1、加入10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5分钟。室温或4度操作均可。（鼠的血液，裂解4-5分钟；人的外周血裂解10-15分钟，裂解过程中适当摇动。）

2、加入2-3倍红细胞裂解液体积的 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。

4、如果红细胞裂解不完全，可以重复步骤2和步骤3。一般极微量的红细胞不影响后续检测。

5、根据实验需要，选用适当溶液重悬细胞沉淀，随后进行计数等后续实验。

注意事项：

1、对于常规操作步骤，多一步洗涤过程的离心；可以节省洗涤液的用量，洗涤效果更好。快速步骤少了一次离心；洗涤效果略差，需要大体积的离心管。

2、本产品为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。

3、如果红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理过的溶液。