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qPCR一文解读

作者:苏州近岸蛋白质科技股份有限公司 2024-11-14T00:00 (访问量:1662)

qPCR原理

在 PCR 反应体系中加入荧光基团,这些荧光基团产生荧光信号,通过对荧光信号的实时监测,可以实现对起始模板DNA数量的定量分析。

                                                图1 qPCR原理示意图

 

原理听起来超简单,但是操作起来真的令人头大,简单的实验却得不到理想结果,这太容易质疑自己了!以下的意外情况你中了几条?

  1. 无扩增信号或扩增效率低;

  2. 非特异性扩增;

  3. 结果重复性差;

    ……

 

一款预混+快速程序的qPCR试剂

NovoStart® Universal Fast SYBR qPCR SuperMix(目录号:E401),助你顺利拿到完美实验结果!

亮点

 定向优化扩增酶性能,在原有技术的基础上显著缩短仪器程序扩增时间,40个循环,时间节省50%以上!

 兼具高灵敏度、高特异性的特点,使qPCR实验更丝滑高效!

 预混通用ROX,可适配所有仪器类型!

 试剂稳定,在37℃可以存放14天!

 

性能展示
01 扩增性能测试

模板:100ng/10ng/1ng/100pg 293T细胞RNA反转的cDNA,10倍梯度稀释

图3 E401对不同浓度模版的扩增性能测试

 

结果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix(目录号:E401),扩增效率高,重复性好。

 

02 实验程序对比

 

03 灵敏度比对

模板:100ng/10ng/1ng/100pg K562细胞总RNA反转的cDNA,10倍梯度稀释

 

1:品牌A   

2:Novoprotein

 1. 品牌B

 2:Novoprotein

图4 E401与其他品牌同类产品的扩增曲线比对

 

结果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix比其他品牌同类产品灵敏度及扩增效率更高。

 

04 仪器适配性能

模板:100ng/10ng/1ng/100pg 293T细胞RNA反转的cDNA,10倍梯度稀释

图5 品牌X和近岸蛋白E401对不同机型检测的适配性测试

结果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix于不同浓度ROX的仪器,都有较好的兼容性。

 

05 稳定性强

模板:100ng/10ng/1ng/100pg K562细胞总RNA反转的cDNA,10倍梯度稀释

 

图6 E401 37℃条件下放置14天,与-20℃条件下存储的试剂进行对比

 

结果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix在37℃放置14天,与-20℃存储的试剂进行对比,性能无明显差异(红色线条为-20℃,蓝色为37℃ )。

 

产品信息

货号

产品名称

规格

规格

E401-01A

NovoStart® Universal Fast SYBR qPCR SuperMix

1ml×5

快速预混ROX

qPCR MIX

 

E401-01B

1ml×25

 

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产品名称

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