预混or非预混，RNA建库试剂盒，你pick哪个呢？

RNA测序，又称为转录组测序，是高通量测序中应用非常广泛的组学技术之一。其研究应用有：

RNA测序实验流程如下：

目前，翌圣生物RNA建库试剂盒不断进行升级，试剂盒越来越便捷，快速。

图.翌圣生物RNA建库试剂盒进化轴

目前，RNA建库试剂盒已经进化到预混版建库试剂盒，试剂组分已经完全简化，每步操作只加一次试剂即可进行PCR。

图.非预混和预混版建库试剂盒组分对比

预混版建库试剂盒，在操作上节省人力时间，而且单次样本越多，效果越明显。

本次对比的试剂盒为翌圣非预混版建库试剂盒（12308）和预混版建库试剂盒（12310）进行操作比对，实验室，使用8个样本进行mRNA建库。

图.实验对比（12308ES VS 12310ES）

#操作详解

1st cDNA合成

该步骤对片段化后的RNA进行逆转录，预混版RNA建库，只需要将1st模块试剂加入片段化后的RNA即可进行PCR，而非预混RNA建库试剂盒，需要分开添加1st逆转录酶和1st逆转录酶buffer。

2nd合成步骤

该步骤承接1st cDNA合成步骤进行二链互补链合成以及末修、加A等步骤。预混版RNA建库试剂盒，只需要将完成1st cDNA PCR步骤的试剂拿出，直接加入2nd 合成试剂即可进行下步PCR操作，而非预混RNA建库试剂盒，需要分开添加2nd合成buffer和酶。

接头连接步骤

该步骤承接2nd二链合成步骤，进行后续接头连接。预混版RNA建库试剂盒，只需要加入接头连接模块和接头，即可进行接头PCR过程，而非预混版RNA建库试剂盒，需要分开添加连接酶、连接buffer以及接头。

后续PCR扩增和文库分选、文库定量等步骤，操作流程类型，此处不再进行赘述。整体看来，预混版RNA建库试剂盒，不论是操作时间，还是操作的便捷度上，都有非常大的优势。尤其是在自动化建库时，这种便捷度，能大大提高自动化效率。

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